MyQuVigen™ – Streptavidin, emi 635 nm

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MyQuVigen納米顆粒是超順磁性氧化鐵和量子點的組合。它們提供了高磁矩和明亮穩(wěn)定的熒光，非常適合廣泛的、多重?zé)晒獬上竦目煽卮挪僮鳌yQuVigen鏈霉親和素?zé)晒獯判约{米顆粒(emi 635 nm)可以普遍結(jié)合生物素綴合的抗體。它們的最大熒光發(fā)射位于635 nm。激發(fā)波長可以是488納米或更短。MyQuVigen鏈霉親和素?zé)晒獯判约{米顆粒或下游復(fù)合物易于使用磁性架(目錄號A20006)進行分離。

MyQuVigen鏈霉親和素?zé)晒獯判约{米顆粒(emi 635 nm)與小鼠抗體一起理想地用于從組織或器官獲得的細胞群體混合物中分離或標記細胞(例如CTC、干細胞)。分離的細胞用強熒光標記，并可直接用于顯微鏡成像或其他基于熒光的細胞分析。分離的細胞也是活的，可以進一步培養(yǎng)或用于下游分子分析，如mRNA分離和RT-PCR。使用MyQuVigen納米顆粒進行細胞分離無需使用色譜柱，因此細胞不會因通過色譜柱基質(zhì)而受到機械應(yīng)力的影響。磁性分離的細胞高度純化，并保持其活力，是下游應(yīng)用的理想選擇。

鏈霉親和素?zé)晒獯判约{米顆粒用于細胞選擇/標記的優(yōu)勢

• 簡單快速地制備納米顆粒-初級小鼠抗體綴合物
• 簡單溫和的細胞分離
• 強而持久的熒光信號
• 一致的高質(zhì)量結(jié)果
• 高結(jié)合能力
• 高生物相容性
• 低非特異性結(jié)合

產(chǎn)品內(nèi)容

• MyQuVigen鏈霉親和素?zé)晒獯判约{米顆粒(emi 635 nm)(目錄號41005)在pH 7.4的磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)中提供。每瓶含1毫升溶液，粒子濃度為1毫克/毫升，足以結(jié)合2000萬個細胞。

容量:5克生物素化抗體/毫升磁珠

納米粒子尺寸:使用動態(tài)光散射測量的200-500納米。

多分散指數(shù) < 0.2.

除磁鐵外的所有材料都應(yīng)儲存在4°c下。

保質(zhì)期:6個月

草案

該協(xié)議提供了濃縮10的一般指南5使用MyQuVigen鏈霉親和素?zé)晒獯判约{米顆粒(emi 635 nm)的細胞。請根據(jù)具體應(yīng)用調(diào)整試劑的量。

1. 使用前，輕輕渦旋或吸取小瓶中的MyQuVigen鏈霉親和素?zé)晒獯判约{米顆粒(emi 635 nm)。




2. 等份50 μl納米粒子溶液用于富集實驗。

注意: 50 μl通常足以富集1-10×105細胞。細胞捕獲效率可受多種因素影響，例如細胞群體中靶細胞的頻率、細胞表面表達的抗原/表位的密度以及抗體親和力。相應(yīng)地調(diào)整納米顆粒的量。

3. 用500 μl洗滌緩沖液洗滌納米顆粒兩次。將磁鐵放在試管側(cè)面1-2分鐘，將納米顆粒從溶液中分離出來，并小心去除上清液(磁鐵仍在側(cè)面)。




4. 向納米顆粒中加入500 ng生物素偶聯(lián)的抗體(體積為100-200 μl ),并在旋轉(zhuǎn)器上孵育30-60分鐘。

注意: 50 μl納米顆粒可以結(jié)合約200 ng的抗體。

5. 用500 μl洗滌緩沖液洗滌納米顆粒-抗體綴合物兩次，以去除未結(jié)合的抗體。




6. 將納米顆粒-抗體綴合物重新懸浮于洗滌緩沖液(50 μl)中，并將其添加至細胞樣品，總體積為0.1-0.5 ml。




7. 在室溫下，將納米顆粒與細胞樣品在軌道振蕩器上孵育30分鐘。




8. 孵育后，使用磁鐵將納米顆粒(與細胞結(jié)合)從溶液中分離出來，并小心去除上清液。




9. 用500 μl細胞培養(yǎng)基洗滌納米顆粒-細胞復(fù)合物兩次。




10. 分離的細胞可以重新懸浮在細胞培養(yǎng)基中用于下游應(yīng)用。

注意:生物素偶聯(lián)抗體也可以直接加入到細胞懸液中，然后應(yīng)用納米顆粒進行細胞捕獲。

圖一。使用生物素-抗人EpCAM抗體和MyQuVigen-鏈霉親和素納米顆粒通過MyQuVigen-抗EpCAM抗體捕獲的人類細胞的代表性圖像。

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