總巰基測試盒

微量法100T/48S

注意：正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

測定意義：

生物體內(nèi)巰基主要包括谷胱甘肽巰基和蛋白質(zhì)巰基。前者不僅能夠修復(fù)氧化損傷的蛋白質(zhì)，而且參與活性氧清除，后者對于維持蛋白質(zhì)構(gòu)象具有重要作用。通過測定總巰基含量和GSH含量，能夠間接測定蛋白質(zhì)巰基含量。

測定原理：

巰基基團與5,5’-二硫代-雙-硝基苯甲酸（DTNB）反應(yīng)，生成黃色化合物，在412nm處有最大吸收峰。

自備實驗用品：

天平、研缽、恒溫水浴鍋、酶標儀、96孔板、乙醇和蒸餾水。

試劑組成和配制： 

試劑一：液體18mL×1瓶，4℃保存。

試劑二：液體1mL×1管，4℃避光保存。 

樣品的制備：

1. 按照組織質(zhì)量（g）：水體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL蒸餾水）進行冰浴勻漿，然后8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2. 血清，培養(yǎng)液：稀釋5倍后測定，可取0.1mL樣本，加入0.4mL蒸餾水，混勻，置冰上待測。

操作步驟：

1. 酶標儀預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長至412nm。

2. 操作表

在96孔板中加入如下試劑

計算公式：

總巰基標準曲線：y = 1.8111x - 0.0037，R2 = 1，x為標品濃度，單位μmol/mL，y為吸光度ΔA。

1. 組織：

（1）按樣本重量計算

總巰基含量（μmol/g 鮮重）=（ΔA+0.0037）÷1.8111×V樣總÷W

=0.552×（ΔA+0.0037）÷W

（2）按樣本蛋白濃度計算

總巰基含量（μmol/mg prot）=（ΔA+0.0037）÷1.8111×V樣總÷Cpr

=0.552×（ΔA+0.0037）÷Cpr

2. 血清、培養(yǎng)液：

總巰基含量（μmol/L）=（ΔA+0.0037）÷1.8111×5×103

=2761×（ΔA+0.0037）

V樣總：加入提取液體積，1mL；W：樣品質(zhì)量，g ；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；5：血清，培養(yǎng)液等液體樣本稀釋倍數(shù)；103 ：1mmol/ L=103μmol/ L

注意事項

*低檢出限為10μmol/L。

上海牧榮生物科技有限公司

1. 國內(nèi)試劑耗材經(jīng)銷代理。

2. 國外試劑的訂購。可提供歐美實驗室品牌的采購方案。

3. 提供加急物流處理，進口貨物，最快交期1-2周。

4. 進出口貨物代理服務(wù)。

5. 公司代理眾多有名生命科學領(lǐng)域的研究試劑、儀器和實驗室消耗品品牌：CELL DATA,Alamanda Polymers， cstti，Click Chemistry tools，Nanoprobes，Ancell，NANOCS，Ambeed, Inc，SPEED BioSystems, LLC，Tulip Biolabs, Inc，Torrey Pines Biolabs，magsphere ,FabGennix International ,paratechs，Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重點合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

6. 質(zhì)量保證，所有產(chǎn)品都提供售后服務(wù)。付款方式靈活。公司堅持“一站式"服務(wù)模式，為客戶全面解決實驗、生產(chǎn)、開發(fā)需求。公司整合國際與國內(nèi)資源，加強網(wǎng)絡(luò)建設(shè)，提高公司內(nèi)部運作效率，為客戶提供方便、快捷的服務(wù)。

7. 公司突出創(chuàng)新思維，提高工作效能，減低運作成本，為客戶提供優(yōu)惠的價格。

總巰基測試盒