吸光度分析和熒光分析是兩種不同但互補的技術，用于檢測和定量樣品中的目標分析物。測量特定波長的紫外光和可見光 （UV-Vis） 的吸光度是定量生物分子的成熟方法之一。同時，熒光分析長期以來一直用于測量熒光團與波長激發(fā)的樣品結合的發(fā)射光譜，以進行高度特異性的分子定量。

1. 靈敏度

吸光度和熒光分析在生命科學實驗室中通常用于測量小體積樣品。微量分光光度計能夠檢測 1 μL 樣品中低至 0.75 ng/μl 的雙鏈 DNA。使用 DeNovix 高靈敏度檢測試劑盒進行熒光分析可產生皮克 （pg） 級靈敏度，可實現(xiàn)低至 0.005 ng/μl 的檢測。

2. 動態(tài)范圍的差異

測量的動態(tài)范圍也是比較方法的一個考慮因素。就測量范圍的寬度而言，吸光度優(yōu)于熒光分析。以 dsDNA 為例，熒光定量試劑盒廣泛的檢測范圍可達 4000 ng/μl，而微量分光光度計中的上限目前為 37500 ng/μl。

3. 檢測要求

吸光度分光光度計直接測量樣品吸收的特定波長的量，無需稀釋或分析制備。相比之下，熒光分析需要將目標樣品與檢測試劑盒中的熒光試劑結合。還必須將樣品與已知濃度的類似樣品進行比較。因此，在進行熒光定量分析時，有必要準備和測量標準曲線。

4. 污染檢測

雖然熒光的特異性有利于評估目標分析物的濃度，但所得數(shù)據(jù)無法深入了解樣品中的任何污染。相比之下，可以通過在一系列波長范圍內進行吸光度光譜測量來推斷出許多不同的污染物。評估 260/280 nm 和 260/230 nm 等比率可提供有價值的信息，并且可以作為樣品質量控制制度的一部分實施。

使用 DeNovix 進行吸光度和熒光分析

DeNovix 認識到將吸光度和熒光分析結合到一個綜合設備中的好處，使科學家能夠利用每種方法的優(yōu)勢。我們的 DS-11 系列將市場上靈敏的超微量紫外-可見分光光度計與集成熒光計相結合。這提供了寬動態(tài)范圍和更高的靈敏度，以及特異性分析物定量和污染物檢測。